三羟甲基氨基甲烷知识详解
三羟甲基氨基甲烷外观为白色晶体粉末状,CAS号为77-86-1,在25℃的温度下,pKa为8.1,水溶液的pH值在10.5-12.0之间。
三羟甲基氨基甲烷的优点:
三羟甲基氨基甲烷的碱性较强,缓冲范围广,实用性强;对生物实验中化学反应干扰小,不与钙、镁及重金属离子发生沉淀。
三羟甲基氨基甲烷的应用:
三羟甲基氨基甲烷的应用领域非常广泛,除了用作生物实验中的缓冲剂,调节实验液体的pH值外,还可以用于护肤品、新型涂料、活性炭和医药领域。
三羟甲基氨基甲烷常见缓冲体系:
①三羟甲基氨基甲烷加上盐酸、氯化钠、氯化钾配置成TBS缓冲剂,用于于清洗免疫染色的组织或Western Blotting中的蛋白印迹膜等;
②三羟甲基氨基甲烷加上盐酸、氯化钠和tween20,配制成TBST缓冲剂,用于蛋白免疫技术中常用的一种洗膜缓冲液;
③三羟甲基氨基甲烷加上盐酸和乙二胺四乙酸,配制成TE缓冲剂,对DNA的碱基有一定保护作用,因此常用于DNA的稳定与储存;
④三羟甲基氨基甲烷加上乙酸和乙二胺四乙酸,配制成TAE缓冲液,是大片段DNA短时间电泳时广泛使用的缓冲系统;
⑤三羟甲基氨基甲烷加上硼酸和乙二胺四乙酸,配制成TBE缓冲剂,用于长时间DNA电泳,对较小片段分离效果较好。
三羟甲基氨基甲烷使用注意事项:
三羟甲基氨基甲烷溶液的pH值对浓度和温度的变化比较敏感,因此使用时要注意调配的比例和温度的影响;另外存放是注意密封、避光、防潮,杜绝结块和二氧化碳的影响。
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